找出酪蛋白等电点并说明原因 鉴定蛋白质有哪些方法?
为什么蛋白质的等电点可以用等电聚焦电泳测定？酪蛋白等电点的测定和制备注意事项酪蛋白等电点的测定和制备注意事项是缓冲液的pH值必须准确。蛋白质在不同pH值的溶液中形成不同的浊度，即最大浊度时的pH值就是蛋白质的等电点，影响蛋白质等电点测定实验结果准确性的因素有哪些？1.样品消化的完整性，如果将等电点不同的蛋白质混合样品放在有pH梯度的环境中进行电泳，在电场的作用下，不管这些蛋白质分子原来的分布如何，各种蛋白质分子都会根据各自的等电点聚焦在pH梯度中相应的位置，经过一定时间的电泳，不同等电点的蛋白质分子会分别聚焦在不同的位置。
1、鉴定蛋白质有哪些方法?方法:将蛋白质放入试管中，用酒精灯加热或加入酸或碱。最简单的方法，燃烧法，可以立即区别于那些没有蛋白质。生物学上有颜色反应，用缩二脲试剂鉴定蛋白质。具体方法如下:首先在组织样本溶液中加入缩二脲试剂A，摇匀(必须营造碱性环境)，然后加入缩二脲试剂B，摇匀。如果组织含有蛋白质，你会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物能与紫红色的缩二脲试剂反应。
颜色深度与蛋白质浓度成正比。蛋白质含量的测定:1。根据凯氏定氮法，蛋白质分子中氮的含量是恒定的(平均为16%)，因此在确定了样品中氮的含量后，就可以计算出样品中蛋白质的含量。2缩二脲法3福林酚试剂法福林酚试剂包括两种试剂:碱式铜试剂、磷钼酸和磷钨酸的混合试剂。碱性铜试剂和蛋白质生成缩二脲试验。蛋白质中反应的酚基(酪氨酸)在碱性条件下很容易将磷钼酸和磷钨酸还原成蓝色的钼蓝和钨蓝，生成的蓝色深浅与蛋白质的含量成正比。
2、找出酪蛋白等电点并说明原因酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质成分。它是牛奶变酸后形成的凝乳状物质。它含有21种氨基酸。它是一种高营养、低脂肪、低胆固醇、气味芳香的食品添加剂。方法根据实验现象判断酪蛋白的等电点:1。最小溶解度法。蛋白质在不同pH值的溶液中形成不同的浊度，即最大浊度时的pH值就是蛋白质的等电点。最差浊度时的pH值就是酪蛋白的等电点。
等电聚焦完成后，切成条，测量不同区段的pH值，用三氯乙酸显色，即可确定酪蛋白的等电点。特征蛋白质在溶液中具有两性离子化。假设一种溶液含有一种蛋白质。当pIpH时，蛋白质极性基团解离的正负离子数量相等，净电荷为0。此时溶液的pH值就是蛋白质的pI值。蛋白质的pI大小是特定的，与蛋白质结构有关，与环境pH无关。
3、影响蛋白质的等电点测定实验结果准确性的因素有哪些1，样品消化的完全程度。比如浓硫酸脱水的样品(有机物)，由于消化不完全，不能被二氧化硫完全还原成氨，会导致测定结果偏低。2.消化温度。不宜用强火消化食物，应保持适度煮沸，以免在没有硫酸的情况下，粘附在凯氏定氮瓶内壁的含氮化合物消化不完全而造成氮的损失。3.蒸馏装置的气密性。如果气密性差(漏气)，蒸馏出来的氨会蒸发损失。
4、酪蛋白等电点的测定和制备注意事项酪蛋白等电点的测定和制备的注意事项是缓冲液的pH值必须准确。酪蛋白等电点的测定是利用酪蛋白溶液中的醋酸和醋酸钠形成各种不同pH值的缓冲液。在一定的溶液中，酪蛋白的溶解度最小时，溶液的pH值就是酪蛋白的等电点。在实验中，缓冲液的pH值必须准确，否则会引起误差，导致实验结果不准确。酪蛋白是一种大而硬的致密凝乳，极难消化和分解。
5、为什么用交错分配法可以测定蛋白质的等电点对于一个特定的蛋白质，在不同的盐体系中，pH与其分配系数的关系应该是不同的，但是在等电点上，得到的是不带电分子的所有分配系数。对于不同的盐体系，等电点处的分配系数应该相等，pH与分配系数关系的两条曲线必须相交于一点，该点对应的pH值就是这种特定蛋白质的等电点。
6、等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点时应注意哪些控制以下项目:PH值、电导率、固体含量、色素与底物的比例、电泳时的温度和电压。1.上样前洗去样品底部未聚合的丙烯酰胺，否则电泳时会发生聚合；2.有商业化的等电聚焦凝胶，但仅限于水平板电泳系统(如pharmacia-LKB，Hoefer)。3.加入过硫酸铵和TEMED，轻轻混合(开始聚合，快速操作)。4.将上述混合溶液倒入灌胶机中(尽量避免气泡)；
7、测定蛋白质等电点的方法的原理是什么等电聚焦电泳(IFE)利用一种特殊的缓冲液(两性电解质)在凝胶(常用的聚丙烯酰胺凝胶)中产生pH梯度。在电泳过程中，每个蛋白质会迁移到等于其等电点(pI)的pH值(此时，蛋白质不再具有净正电荷或负电荷)，形成非常窄的条带。另一种方法是根据蛋白质在等电点的溶解度，配制一系列不同pH值的缓冲液来测定蛋白质的溶解度，溶解度最低的pH就是蛋白质的pI。
8、等点聚焦电泳为什么可以测定蛋白质的等电点?蛋白质分子是典型的两性电解质分子。在等电点以上的pH环境中解离成带负电的阴离子，迁移到电场的正极，在等电点以下的pH环境中解离成带正电的阳离子，迁移到电场的负极，这种游动只有在等于其等电点的pH环境下，也就是蛋白质净电荷为零时才能停止。如果将等电点不同的蛋白质混合样品放在有pH梯度的环境中进行电泳，在电场的作用下，不管这些蛋白质分子原来的分布如何，各种蛋白质分子都会根据各自的等电点聚焦在pH梯度中相应的位置，经过一定时间的电泳，不同等电点的蛋白质分子会分别聚焦在不同的位置。
